Сделать иммуноферментный анализ. Иммуноферментный анализ (ИФА)Enzyme immunoassay (EIA)

ИФА (иммуноферментный анализ, ELISA – англ.) вошел в жизнь практической медицины еще где-то в 60-х прошлого столетия. Первоначальной его задачей были гистологические исследования в научных целях, которые сводились к поиску и идентификации антигенной структуры клеток живого организма.

В основе метода ИФА лежит взаимодействие специфических (АТ) и родственных антигенов (АГ) с образованием комплекса «антиген – антитело» , который выявляют при помощи фермента. Этот факт натолкнул ученых на мысль, что метод может быть использован в диагностических целях для выявления специфических иммуноглобулинов различных классов, участвующих в иммунном ответе на ту или иную инфекцию. И это был прорыв в клинической лабораторной диагностике!

Активно использоваться метод начал только в начале 80-х и то, в основном, в специализированных учреждениях. Первыми иммуноферментными анализаторами были снабжены центры и станции переливания крови, инфекционные и венерологические стационары, поскольку рожденный на африканском континенте, появившийся на горизонте у нас и тут же примкнувший к «старым» инфекциям грозный СПИД, требовал незамедлительных мер диагностики и поиска лечебных препаратов, воздействующих на него.

Область применения метода ИФА

Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии? Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека. В настоящее время иммуноферментный анализ широко используется и в ветеринарной службе, ведь «братья наши меньшие» тоже подвержены многим заболеваниям, от которых, порой, очень сильно страдают.

Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:

• Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
• Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, В и С, хламидиоз, сифилис, и , и , а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
• Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию формирования иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

В чем суть ИФА?

Иммуноферментный метод, позволяет определить не только присутствие самого возбудителя (качественный анализ), но и его количественное содержание в сыворотке крови больного.

Вирусовая или бактериальная доза существенно влияет на течение инфекционного процесса и его исход, поэтому количественному анализу отведена не последняя роль в диагностике и лечении заболеваний в различных формах и стадиях.

Однако зная иммуноферментные исследования, как метод ИФА, мы даже не задумываемся, как же ему удается охватить такой широкий круг микроорганизмов, населяющих нашу планету, многие из которых несут прямую угрозу здоровью и жизни человека и животных. А дело в том, что ИФА имеет много вариантов (неконкурентный и конкурентный – прямой и непрямой), каждый из которых решает свою задачу и, таким образом, позволяет проводить целенаправленный поиск.

Для выявления иммуноглобулинов того или иного класса используется традиционная 96-луночная полистироловая панель (планшет), в лунках которой в твердой фазе сосредоточены сорбированные рекомбинантные белки. Попавшие в лунку с сывороткой крови антитела или антигены, находят «знакомый» объект и образуют с ним комплекс (АГ – АТ), который, закрепившись ферментным конъюгатом, при считывании результатов проявится изменением окраски лунки.

Иммуноферментный анализ проводится на тест-системах определенной специфичности, изготовленных в специальных лабораториях и укомплектованными всеми необходимыми реагирующими компонентами. Исследования можно проводить с помощью промывных аппаратов («вошеров») и считывающих спектрофотометров, где большей частью задействован ручной труд. На полных автоматах, освобождающих лаборанта от монотонного закапывания, промывания и прочих рутинных дел, конечно, работать быстрее и удобнее, но не все лаборатории могут позволить себе такую роскошь и продолжают работать по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация результатов ИФА находится в компетенции врача лабораторной диагностики, при этом обязательно берется в расчет и присущее практически всем иммунохимическим реакциям свойство давать ложноположительные или ложноотрицательные ответы.

Видео: современное проведение иммуноферментного анализа

Результаты ИФА на примере сифилиса

Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм , а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак. В работе используются планшеты с определенной специфичностью (АТ классов А, М, G) или суммарные антитела.

Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

• IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
• IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
• IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования. Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

Самый волнительный из иммуноферментных анализов – ИФА на ВИЧ

Анализ на , пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков. Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

Иммуноферментный метод, применяемый для диагностики ВИЧ инфекции, относится к первостепенным стандартным исследованиям, которые, однако, требуют особых условий, поскольку тема очень деликатная.

ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций , предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным. Он может закончиться через 14-30 дней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок. Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

Что можно ожидать от результатов на ВИЧ?

ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

1. Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
2. Повторный (+) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
3. Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
4. Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

При внедрении тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

• IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
• IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
• IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается , то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает. Между тем, определение нормы титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

Видео: учебный фильм МГМУ им. Сеченова об основах ИФА

Иммуноферментный анализ выявляет специфические антитела или антигены к ряду заболеваний. Благодаря технологии диагностики обнаруживаются вещества белкового происхождения. Лечащий врач дает разъяснения, почему ИФА положительный и что это значит. Для постановки диагноза учитываются результаты теста и анамнез пациента.

Что это значит

Метод исследования начал применяться несколько десятилетий назад. С тех пор усовершенствовалась технология проведения, возросла точность результатов. Преимуществом диагностики является высокая чувствительность. Есть и недостаток — методика подразумевает поиск заданного агента, т.е. необходимо предполагать его присутствие в организме.

Инородная частица (антиген) попадает в организм вместе с возбудителем инфекции (агентом). Антигеном может являться также частица чужой крови, не совпадающая по группе. Наличие таких факторов вызывает иммунную реакцию. В результате сложных нейронных процессов происходит выработка иммуноглобулинов. Они соединяются с чужеродными молекулами, создавая иммунный комплекс. В такой форме организм легче распознает частицы и уничтожает их силами иммунной системы. Каждому типу микроорганизма соответствуют вырабатываемые специфические антитела.

Для проведения тестирования производится забор крови из вены. Затем из материала удаляются форменные соединения, которые могут препятствовать проведению исследования. Иногда в качестве биологического материала производится забор образцов слизистой оболочки или спинномозговой жидкости, в ряде случаев производится анализ околоплодных вод. В лаборатории используются специальные планшеты, в лунках которых находятся подготовленные частицы патогенных микроорганизмов. Лаборант помещает туда забранный материал и наблюдает, образуются ли иммунные соединения.

Для получения точных результатов сдавать анализ необходимо натощак. За 2 недели до сдачи материала следует прекратить прием противовирусных лекарственных средств и антибиотиков.

Анализ позволяет подтвердить следующие заболевания:

• токсоплазмоз;
• герпес различных типов;
• цитомегаловирус;
• сальмонеллез;
• дизентерия;
• хеликобактериальная инфекция;
• корь;
• клещевой энцефалит;
• краснуха;
• заболевания половой системы;
• гепатит.

Это неполный список назначений, в него также входит ветряная оспа, сифилис и другие заболевания, в том числе вызываемые различными кокками.

Обнаружение хотя бы одного иммуноглобулина говорит о том, что результат ИФА положительный:

1. Об острой стадии инфекционной патологии говорит обнаружение IgM. Это подтверждает одновременное присутствие IgA. Отрицательный результат в некоторых случаях может означать хронизацию заболевания.
2. Положительный показатель IgA сигнализирует о заболевании, протекающем в скрытой форме, или о наличии хронического процесса.
3. Обнаружение IgG в разных случаях может означать наличие хронической формы болезни или указывать на ремиссию.

В бланке может быть указана информация только о наличии или отсутствии возбудителя. В ряде случаев указывается количественный показатель. Иногда исследование направлено на определение уровня концентрации антител. Для этого определяется коэффициент позитивности ИФА. Этот показатель позволяет определить, как долго протекает патологический процесс в организме.

Что делать

Врач-инфекционист занимается диагностикой и лечением болезней инфекционного характера, поэтому в большинстве случаев назначает исследование этот специалист.

Если ИФА показал положительный результат, следует обратиться к врачу. Недопустимо самостоятельно делать выводы, проводить лечение. Самостоятельно разобраться в показателях сложно, расшифровку результатов необходимо получить у специалиста.

На показатели в анализе крови могут влиять такие факторы, как курение, употребление алкоголя, применение некоторых групп препаратов. Врач может назначить повторное обследование для исключения погрешности в результатах. Иногда для подтверждения диагноза назначаются дополнительные виды исследований.

Не следует преждевременно делать выводы при положительном тесте. Однако своевременно проведенное исследование позволит установить заболевание и назначить необходимое лечение.

Вконтакте

Иммуноферментный анализ крови (ИФА) проводится для комплексной оценки защитных функций организма. В ходе проведения исследования определяется количество и свойства иммунных клеток, присутствие необходимых антител. ИФА анализ крови проводится для диагностики инфекционных, гематологических, аутоиммунных заболеваний, первичных и вторичных иммунодефицитов. Рассмотрим, что собой представляет анализ крови методом ИФА, и какие показания существуют для проведения данного исследования.

Что это такое

Анализ крови методом ИФА является лабораторным методом, с помощью которого в пробе крови определяют антитела или антигены. Данное исследование используется для выявления уровня иммуноглобулинов, иммунологических комплексов, гормонов.

Показания к анализу

Для назначения ИФА анализа крови существуют следующие показания:

• диагностика инфекций, которые передаются половым путем – уреаплазма, микоплазма, хламидиоз, трихомонада, сифилис;
• диагностирование вирусных заболеваний – цитомегаловирус, герпес, гепатиты, Эпштейн-Барр вирус;
• определение уровня гормонов;
• диагностика онкологических заболеваний;
• определение иммунодефицита;
• диагностирование аллергий;
• предоперационное комплексное обследование перед пересадкой органов;
• оценка эффективности терапии.

Принцип метода

Принцип действия метода иммуноферментного анализа основан на определении в крови специфических белков-антител – иммуноглобулинов. Иммуноглобулины вырабатываются иммунной системой человека при проникновении в организм антигенов (чужеродных микроорганизмов). Такие иммунные молекулы связываются с множеством инфекционных возбудителей в организме и нейтрализуют их.

Иммуноглобулины обладают важной характеристикой – специфичностью. Благодаря этому они могут связываться с определенным антигеном, образуя комплекс антиген-антитело. Во время проведения ИФА анализа крови именно этот комплекс определяют качественно и количественно.

Различают иммуноглобулины пяти классов. Но обычно определяют три класса – иммуноглобулины A, M, G. Данные антитела накапливаются в организме в разное время от момента инфицирования.

• Иммуноглобулины класса М (IgM) появляются в крови самыми первыми на пятые сутки от момента заражения. Они находятся в организме на протяжении 5–6 недель, затем исчезают из кровотока. Антитела IgM указывают на острый период заболевания или обострение болезни при ее хроническом течении.
• Примерно через 3–4 недели со времени заражения в крови появляются иммуноглобулины класса G (IgG) . Они могут существовать в крови человека несколько месяцев или даже лет. Согласно расшифровке ИФА анализа крови, если в двух пробах крови, взятых последовательно через две недели, увеличено количество иммуноглобулинов IgG, говорят о текущей инфекции или реинфекции – повторном заражении той же инфекцией.
• Иммуноглобулины класса А (IgA) можно выявить данным методом исследования через 2–4 недели после заражения или обострения инфекционной болезни. Из них только 20% циркулирует в крови, остальные находятся в секрете слизистых оболочек. Антитела IgA исчезают из кровотока через 2–8 недель после уничтожения инфекционных агентов. Исчезновение данных иммуноглобулинов означает излечение от инфекции. Если после окончания болезни определено присутствие в крови антител IgA, значит, заболевание перешло в хроническую стадию.

Подготовка к анализу

Для проведения анализа крови методом ИФА чаще всего используют кровь человека. Но исследовать также можно содержимое стекловидного тела, спинномозговую жидкость, околоплодные воды.

Проба крови для исследования берется у пациента из локтевой вены. Сдавать кровь рекомендуется натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти не меньше 12 часов). Необходимо сообщить врачу, если пациент принимает лекарственные препараты, так как некоторые из них могут изменить результат анализа. На достоверность результатов исследования влияет прием алкоголя и наркотиков.

Расшифровка

В бланке результата данного анализа указывается положительный (+) или отрицательный (-) результат определения каждого класса иммуноглобулинов.

Рассмотрим интерпретацию возможной расшифровки ИФА анализа крови.

• Отрицательный результат IgM, IgG, IgA – отсутствие иммунитета к инфекции.
• Отрицательный результат IgM, IgA и положительный результат IgG – постинфекционный или поствакцинальный иммунитет.
• Отрицательный или положительный результат IgG, IgA и положительный результат IgM – острая инфекция.
• Положительный результат IgM, IgG, IgA – обострение хронического инфекционного заболевания.
• Отрицательный результат IgM и отрицательный или положительный результат IgG, IgA – хроническая инфекция.
• Отрицательный результат IgM и не определяются IgG, IgA – выздоровление.

Преимущества метода

Анализ крови методом ИФА имеет много достоинств. Можно выделить основные из них:

• относительно высокая точность (чувствительность);
• возможность проведения ранней диагностики;
• возможность отслеживания динамики инфекционного процесса;
• высокий уровень унификации, что позволяет проводить массовые обследования;
• небольшой промежуток времени, необходимый для получения результата анализа;
• удобство в работе;
• автоматизация всех этапов анализа;
• относительно небольшая стоимость.

Недостатки

Недостатком метода ИФА является то, что иногда он дает ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Кроме технических ошибок при проведении исследования, причиной ложных результатов может быть ревматоидный фактор у пациента, наличие у него хронических болезней (при которых вырабатываются антитела), нарушения обмена веществ, прием некоторых лекарственных препаратов.

• аскаридоз;
• трихинеллез – анализ проводят несколько раз, максимальный уровень антител определяется на 4–12 неделе после заражения;
• цистицеркоз;
• тениоз;
• фасциолез – антитела определяются в острой стадии заболевания;
• описторхоз – проводят дифференциальную диагностику между хронической и острой формой болезни;
• лямблиоз;
• висцеральный и кожный лейшманиоз;
• амебиаз;
• токсоплазмоз.

4.2 4.20 из 5 (5 Голосов)

ИФА или иммуноферментный анализ относится к серологическим исследованиям и предназначен для обнаружения и диагностики патологических микроорганизмов в сыворотке крови.

Посредством анализа определяют различные классы иммуноглобулинов к бактериям: IgM — при остром патологическом процессе, а IgG на стадии выздоровления, которые в отдельных случаях сохраняются на протяжении всей жизни.

Посредством иммуноферментной диагностики выявляют заболевания различной этиологии:

Также ИФА показан для диагностирования сифилиса при подтверждении положительных результатов методом РВ, и позволяет отслеживать эффективность лечения при патологическом процессе.

Иммуноферментный анализ назначается по показаниям (при подозрении на заражение микроорганизмами), является обязательным при беременности и перед хирургическими операциями для выявления носительства различных бактерий.

Положительный ИФА

Положительный результат ИФА подтверждается наличием иммуноглобулинов класса IgG и IgM. Выявленные титры в крови IgM всегда указывают на болезнь в прогрессирующей стадии, у здорового человека данные антитела отсутствуют.

А IgG свидетельствует о перенесенной ранее инфекции, либо о носительстве патогенных микроорганизмов, некоторые из которых в незначительном количестве расцениваются в пределах нормы. К примеру, бактерии стрептококков и стафилококков присутствуют в каждом человеческом организме.

Сифилис

Антитела IgM при сифилисе обнаруживаются со 2 недели после заражения и указывают на наличие первичного, вторичного или врожденного эпизода, при лечении они исчезают приблизительно через полгода, при отсутствии терапии — через 18 месяцев. Если одновременно выявляются оба вида иммуноглобулинов – подтверждается сифилис в острой фазе. У переболевших людей антитела IgG к сифилису остаются в сыворотке пожизненно.

Вирусные гепатиты

IgM к вирусному гепатиту часто выявляются еще в инкубационном периоде заболевания, до появления первых проявлений и сохраняются во время течения болезни, после излечения – не определяются. Исключение составляет вирусный гепатит С, при котором IgM обнаруживаются как на его активной, так и скрытой или хронической стадии

Антитела IgG на гепатит А могут присутствовать даже у здоровых людей, что обусловлено перенесенной инфекцией или снижением иммунитета, а наличие IgG к гепатитам В, С и D у здоровых людей не наблюдается.

ЦМВИ

ЦМВИ распространена практически повсеместно и не представляет угрозы здоровью населения. Однако несет смертельную опасность для новорожденного и плода при внутриутробном инфицировании.

Выявление антител IgM к цитомегаловирусу указывает на первичное инфицирование или активацию латентной фазы. Титры IgG сохраняются у переболевших людей на протяжении 10 лет.

Герпес

Антитела к вирусу герпеса у здоровых людей в норме отсутствуют. Содержание IgM указывает на острую фазу заболевания, IgG – на скрытую (в данном случае человек является носителем инфекции). При содержании IgG к герпесу следует знать, что вирус в любое время способен активизироваться из латентной стадии в прогрессирующую.

Ветряная оспа

При ветряной оспе и в течение 2 лет после излечения в крови сохраняются иммуноглобулины класса IgM. В норме у здоровых людей антитела к ветряной оспе не выявляются.

Болезни, вызываемые стафилококками и стрептококками

У всех людей присутствуют иммуноглобулины к стафилококкам и стрептококкам. Поэтому диагностировать патологический процесс, вызванный данными группами бактерий можно посредством проведения двукратного иммуноферментного метода. Если отмечается нарастание титров при повторном ИФА (через неделю после первого), то анализ считается подтвержденным.

Хламидиоз

О положительном результате на хламидии свидетельствует выявление IgM титрами 1:8 и выше, и класса IgG – 1:64 и выше, которые повышаются во время течения болезни и достигают высоких значений. К примеру, у детей с хламидийной пневмонией, титры повышаются до 1:2000 – 1:4000. Наличие IgM свидетельствует об активности хламидий, через некоторое время после инфицирования в крови выявляются глобулины IgG.

Об отрицательном иммуноферментном анализе свидетельствует отсутствие антител IgM . Определяющиеся IgG не во всех случаях расценивают как подтверждение диагностического исследования, часто они сохраняются на протяжении нескольких лет после перенесенной инфекции, иногда пожизненно.

После сифилиса, инфекционного мононуклеоза иммуноглобулины IgG сохраняются на протяжении всей жизни и определяются в сыворотке крови. На протяжении 10 лет остаются микроорганизмы ЦМВИ, кори, краснухи, токсоплазмоза.

Титры к амебиазу сохраняются от нескольких месяцев до нескольких лет. Антитела к бактериям стафилококка и стрептококка определяются абсолютно у всех людей в небольшом количестве.

В вышеперечисленных случаях выявление иммуноглобулинов IgG после перенесенных заболеваний позволяет расценивать результаты ИФА, как отрицательные.

Норма при беременности

В первом триместре беременности каждая женщина проходит полное обследование организма, которое включает в себя иммуноферментный анализ.

Обязательными являются исследования на токсоплазмоз, ЦМВИ, хламидии, герпес 2 типа (генитальный), краснуху, уреаплазму и микоплазму, так как эти заболевания несут серьезную угрозу для развития плода. Они способны проникать в организм ребенка, минуя плацентарный барьер.

А особую опасность представляют на протяжении первого триместра беременности и практически всегда ведут к внутриутробной гибели плода и самопроизвольному выкидышу .

Проблема вышеперечисленных болезней в том, что они часто протекают в бессимптомной стадии, без видимых клинических проявлений, и выявить их возможно только посредством иммуноферментной диагностики.

Выявление титров IgG на краснуху указывает на перенесенное ранее заболевание и является нормой при беременности. IgG к ЦМВИ также не несут особой угрозы для плода, однако, не исключается возможность обострения (частота проявления, примерно 1-2%).

Особую угрозу представляет собой наличие IgG к вирусу герпеса 2 типа или генитальному (ВПГ2), так как риск обострения значительно повышается во время родов. В гестационном периоде частота проявления острой фазы случается в 0,9% случаях. Поражение плода вирусом герпеса при прохождении половых путей происходит в 40% случаях и приводит к летальному исходу в 50%.

При перенесенном токсоплазмозе IgM могут сохраняться до 2 лет после лечения. Риск заражения плода в этом случае составляет 17% в первом триместре и увеличивается до 60% к третьему, так как основной путь инфицирования – трансплацентарный. Выявленные IgG к токсоплазмозу многие специалисты склонны оценивать, как отрицательный результат, который практически не представляет угрозы для течения беременности.

В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней широкое применения нашел метод иммуноферментного исследования крови (ИФА), основанный на обнаружении специфических, характерных для возбудителей антител.

В чем суть метода?

Чтобы это понять, следует знать, как работает иммунная система человека, что такое антиген, антитела, какие функции они выполняют.

• Антиген в нашем организме представляет собой молекулу, которая специфично связывается с антителом. Он переносит определенную информацию о клетке.
• Когда в кровь попадает чужеродный антиген, начинают вырабатываться антитела (иммуноглобулины Ig), которые распознают его и стремятся уничтожить.
• Такое взаимодействие называется иммунным комплексом, на котором и основан метод диагностики ИФА.
• Анализ позволяет определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ, поэтому важен для комплексной диагностики .

Кому показана диагностика?

Специалист может назначить исследование с целью:

По сравнению с другими методами исследования ИФА обладает целым рядом преимуществ:

Задайте свой вопрос врачу клинической лабораторной диагностики

Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).

Из недостатков можно отметить возможную неточность расшифровки . Иногда анализ показывает ложноотрицательный или ложноположительный результат, особенно при неправильной подготовке или нарушении техники выполнения.

Как выполняется?

Процедура ничем не отличается от взятия материала для .

• После назначения анализа пациент направляется в лабораторию для забора венозной крови. Процедура проводятся утром на голодный желудок.
• Материал отправляется в лабораторию, где из крови получают сыворотку, в которой находятся антитела.
• Сыворотку помещают в пробирки с наборами антигенов. В практике таких наборов применяется много. Это могут быть разные аллергены (пыльца, шерсть, цитрусовые, молоко и другие), возбудители инфекционных и вирусных заболеваний и другие.
• После получения реакции остатки сыворотки сливают. Количество антител определяют при помощи специальных индикаторов.

Сроки изготовления анализа

Срок выполнения зависит от конкретной лаборатории. Некоторые лаборатории предоставляют результаты в течении 1-2 дней , другие в течение 1 недели. Задержки могут быть из-за накопления определенного количества сывороток.

Подготовка к исследованию

Перед сдачей анализа следует придерживаться простых правил подготовки:

• Исключить прием любых медикаментозных средств накануне анализа. Если это невозможно, обязательно поставьте в известность врача, назначающего диагностику. Особое внимание уделяется лекарствам от аллергии. Если пациент принимает антигистаминные препараты, следует проконсультироваться с врачом, за сколько до начала исследование нужно их отменить. Это касается и некоторых лекарств для щитовидной железы. Иначе концентрация ТТГ может быть определена неправильно и результат нормы и патологии будет получен неверно. Как правило, в норме антибактериальные, противовирусные, антигистаминные препараты прекращают принимать за 10-16 дней до диагностики .
• Кровь забирается строго натощак . Последний прием пищи в норме должен быть за 8-12 часов до поездки в лабораторию.
• Нельзя принимать алкогольные напитки и курить, иначе это повлияет на норму результатов.
• Следует исключить любые стрессовые факторы, физические нагрузки. Обязательно хорошо выспаться.

Все, что вам необходимо знать про анализ на примере одной из лабораторий

Что может повлиять на результаты?

Анализ ИФА — достаточно точный метод исследования. Погрешности возникают в случаях:

• нарушении процедуры взятия материала;
• при неправильной транспортировки и хранении материала;
• во время приема некоторых медикаментозных средств (препараты для щитовидной железы, например, которые могут повлиять на концентрацию ТТГ);
• при наличии скрытых заболеваний (в том числе ЗППП, хламидии, например), нарушениях обмена веществ, иммунодефиците;
• в период новорожденности, когда в норме в организме присутствуют еще материнские антитела.

Расшифровка, значения (нормы и патологии)

Когда анализ будет готов, пациент получает бланк, где указываются отрицательные (-) и положительные (+) результаты определения каждого класса иммуноглобулинов. Интерпретация может быть такая:

• На выздоровление пациента указывают отрицательный результат IgM , без определения IgA, IgG.
• Хроническое инфекционное заболевание подразумевает расшифровка: (-) IgM и отрицательный, положительный IgG, IgA.
• Об отсутствии защитной реакции к инфекциям указывают (-) значения IgM, IgG, IgA.
• Острая инфекция обнаруживается при отрицательном или положительном IgG и IgA, (+) IgM.
• Постинфекционный иммунитет при (-) IgM, IgA и положительном значении IgG.
• Обострение хронического заболевания — (+) показателях IgM, IgG, IgA.

Наглядная демонстрация ИФА анализа

Где сделать?

Анализ крови методом ифа считается востребованной диагностикой и предлагается различными лабораториями, клиниками города.

В Москве анализ ИФА можно сделать:

• в лаборатории Ниармедик,
• Инвитро,
• Царской клинике,
• Дельтаклинике,
• ЛДЦ Кутузовском,
• МедЦентрСервисе,
• сети Онклиник,
• Чудо докторе,
• Семейном докторе,
• К+31,
• ООО Медицине и других.

В Санкт-Петербурге анализ ИФА проводится

• в Мэдисе,
• Американской медицинской клинике,
• Клинике доктора Филатова,
• Medem,
• Клинике Доктора Пеля,
• Лека-Фарм,
• Инклиник,
• Экспрессе и других.

Очень полезный учебный фильм про анализ ИФА

Стоимость исследования

Складывается от количества нужных маркеров. Чем больше маркеров, тем выше цена.

Цена на определение антител к

• цитомегаловирусу Igm/IgG варьируется в пределах 350-700 рублей,
• к микоплазме 340-520 рублей,
• к кандиде 320-450 рублей,
• Анти-Хламидия tr. IgA + Анти-Хламидия tr. IgG 1000-1300,
• антитела класса IgM к Хламидии 500-600 рублей и т.д.
• Забор крови в среднем составляет 150-250 рублей.

Некоторые клиники и лаборатории предоставляют услугу отправки результатов по электронной почте. Услуга бесплатна.